甲基转移酶METTL3介导m6A甲基化调控犬JBMMSCs成骨分化

摘要

目的：探究甲基转移酶METTL3对颌骨骨髓间充质干细胞（Jaw bone marrow mesenchymal stem cells, JBMMSCs）增殖、迁移及成骨分化的影响。方法：体外培养JBMMSCs，慢病毒转染构建沉默METTL3基因细胞模型，转染后siMETTL3组JBMMSCs mRNA水平（P<0.001）及蛋白水平（P<0.01）下降。检测两组细胞的增殖、迁移、碱性磷酸酶活性、钙沉积以及成骨相关因子骨钙素（osteocalcin,OCN）mRNA及蛋白水平。结果：与沉默对照（siNC）组相比，siMETTL3组培养24、48、72、96 h的增殖活性降低（P<0.001）,24 h后细胞迁移能力下降（P<0.05）。成骨诱导7 d后siMETTL3组碱性磷酸酶活性下降，21 d后矿化沉积较siNC组少。qRT-PCR及Western Blot显示，OCN的mRNA(P<0.001)和蛋白（P<0.05）表达水平降低。结论：沉默METTL3可抑制JBMMSCs的增殖、迁移及成骨分化。

关键词

METTL3 / 颌骨骨髓间充质干细胞 / 成骨分化 / m6A甲基化