益气化痰方抑制NLRP3炎症小体对抑郁小鼠突触功能障碍的调控作用研究

摘要

目的：研究益气化痰方通过抑制小胶质细胞NLRP3炎症小体和A1型星形胶质细胞激活对慢性温和不可预测应激（CUMS）抑郁小鼠模型突触功能障碍的调控作用。方法：将C57BL/6J小鼠分为正常组、模型组、MCC950组和益气化痰方组。除正常组外，其余各组均采用CUMS建立抑郁模型，分别给予MCC950或益气化痰方进行治疗。通过蔗糖偏好实验、新奇抑制摄食实验、悬尾实验、强迫游泳实验评估小鼠抑郁样行为；高尔基染色法观察小鼠海马突触结构；免疫荧光染色检测小鼠海马GFAP与C3、Iba1与NLRP3的共定位情况；实时荧光定量PCR检测TNF-α、IL-1α、C1qA mRNA表达水平；免疫印迹法检测小鼠海马SYP、PSD-95、C3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β的蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠蔗糖偏好率显著降低，新奇抑制摄食实验中摄食潜伏期延长，悬尾实验和强迫游泳实验不动时间延长（P<0.05），海马树突分支数目及树突棘密度减少（P<0.01）,GFAP与C3、Iba1与NLRP3共定位阳性细胞数显著增多（P<0.01）,TNF-α、IL-1α、C1qA mRNA表达水平显著增高（P<0.01）,SYP、PSD-95蛋白表达水平降低（P<0.05）,C3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均显著增高（P<0.05）；与模型组比较，益气化痰方组小鼠蔗糖偏好率升高，新奇抑制摄食实验摄食潜伏期、悬尾实验和强迫游泳实验不动时间显著缩短（P<0.01），海马树突分支数目及树突棘密度显著升高（P<0.01）,GFAP与C3、Iba1与NLRP3共定位阳性细胞数显著减少（P<0.01）,TNF-α、IL-1α、C1qA mRNA水平显著降低（P<0.01）,SYP、PSD-95蛋白表达水平升高（P<0.05）,C3、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均显著减少（P<0.05）。结论：益气化痰方可通过抑制海马小胶质细胞NLRP3炎症小体活化，减少具有神经毒性的A1型星形胶质细胞激活，从而减轻突触功能损伤，改善CUMS小鼠抑郁样行为。

关键词

抑郁症 / 益气化痰方 / NLRP3炎症小体 / 小胶质细胞 / 星形胶质细胞 / 突触功能障碍