下调Nur77抑制PI3K/AKT信号通路促进肺腺癌细胞凋亡和自噬

摘要

目的：探讨Nur77对肺腺癌细胞凋亡和自噬的影响及其调控机制。方法：收集右江民族医学院附属西南医院（百色市人民医院）经病理确诊的肺腺癌及癌旁组织5例，免疫荧光法检测Nur77的表达情况；生物信息学分析Nur77相关基因通路；体外培养人支气管上皮细胞BEAS-2B和人肺癌A549两株细胞系，分别记为BEAS-2B组和A549组。RT-qPCR检测两组细胞Nur77 mRNA的表达水平，Western blot检测Nur77、LC3、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达情况；免疫荧光检测Nur77的表达水平及亚细胞定位；将A549细胞分为si-NC组、si-Nur77组及Con组，si-NC组及si-Nur77组分别转染si-NC、si-Nur77,Con组未进行转染处理。RT-qPCR检测si-NC、si-Nur77组细胞Nur77 mRNA表达水平；Western blot检测Nur77、LC3、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：肺腺癌组织Nur77蛋白表达水平高于癌旁组织；生物信息学分析显示Nur77与PI3K/AKT信号通路存在相关性；A549细胞Nur77 mRNA和蛋白表达水平均高于BEAS-2B细胞（P<0.001）,A549细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、p-AKT/AKT比值均高于BEAS-2B细胞（P<0.05）,A549细胞p-PI3K/PI3K比值高于BEAS-2B细胞（P<0.01）; si-Nur77组Bcl-2表达低于si-NC组（P<0.05）,si-Nur77组Caspase-3、Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值高于si-NC组（P<0.01），而p-AKT/AK、p-PI3K/PI3K在si-Nur77组低于si-NC组（P<0.05）,si-Nur77组细胞凋亡率高于si-NC组（P<0.05）。结论：下调Nur77可促进肺腺癌细胞自噬和凋亡，其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词

Nur77 / 肺腺癌 / PI3K/AKT信号通路 / 凋亡 / 自噬