E3泛素化连接酶TRIM29在骨肉瘤细胞生长中的调控机制研究

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20240506.003

海南医学院学报 ›› 2024, Vol. 30 ›› Issue (14) : 1041 -1047. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20240506.003

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摘要

目的：E3泛素化连接酶TRIM29与肿瘤的恶性生长紧密相关，本研究旨在分析并探讨TRIM29在骨肉瘤中的表达及其潜在的分子机制。方法：通过蛋白质印迹法（Western blot）、免疫组化（IHC）及qRTPCR分析骨肉瘤组织中TRIM29基因的表达情况，采用siRNA质粒转染至骨肉瘤细胞U2OS中，CCK8和EDU检测骨肉瘤细胞的增殖能力，进一步采用葡萄糖摄取量、乳酸生成量及G6P检测糖酵解水平变化并分析潜在机制，建立BACB/c裸小鼠皮下移植瘤模型，观察下调TRIM29观察对荷瘤瘤生长的影响。结果：qRTPCR结果证实与正常组织相比，骨肉瘤组织中TRIM29的mRNA表达水平显著提升，进一步结果也证实其蛋白水平也同样显著提升。下调骨肉瘤细胞中TRIM29的表达后，CCK8及EDU实验皆表明其增增殖能力减弱，相反其凋亡比例升高，细胞于G1区阻滞，其乳酸生成量、葡萄糖消耗、G6P也相应的减弱，糖酵解关节限速酶HKII、PFKFB3、PKM、LDHA及GLUT1等蛋白也相应的减低，同样体内实验也表明下调TRIM29的表达后，荷瘤鼠体积、重量也随之减轻，生长速度减慢。结论：TRIM29在骨肉瘤中高表达，抑制骨肉瘤细胞中TRIM29的表达后，其细胞增殖能力及糖酵解水平减低。降低TRIM29的表达通过抑制细胞糖酵解水平进而抑制骨肉瘤细胞的生长。