miR-21-5p靶向BNC2调控食管癌的恶性生物行为的研究

邓雨函, 阳梦, 吴振华, 李卉, 热则耶·麦麦提祖农, 孙晓宏

doi:10.13210/j.cnki.jhmu.20240510.001

海南医学院学报 ›› 2024, Vol. 30 ›› Issue (16) : 1236 -1245. DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20240510.001

miR-21-5p靶向BNC2调控食管癌的恶性生物行为的研究

邓雨函, 阳梦, 吴振华, 李卉, 热则耶·麦麦提祖农, 孙晓宏

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摘要

目的：探讨miR-21-5p靶向肌成纤维细胞的身份转录因子（BNC2）调控食管癌（esophageal cancer,ESCA）细胞增殖、迁移、侵袭机制。方法：应用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检测食管癌组织中miR-21-5P和BNC2的相对表达量并用统计学分析其是否存在表达差异。用miR-21-5p mimics和miR-21-5P inhibitor和阴性对照（NC包括mimcs NC、inhibitor NC）分别转染ECA109、KYSE30两个食管癌细胞系后，进行细胞功能试验CCK8,Transwell等实验方法观察当miR-21-5p过表达或敲低时细胞的增殖、迁移和侵袭能力是否受到影响。通过生物信息学方法预测分析miR-21-5P的靶基因并通过双荧光素酶实验、qRT-PCR和Western blot实验验证miR-21-5p与靶向基因的负向调控关系。结果：qRT-PCR结果显示，相对于癌旁组织，BNC2在食管癌组织中的表达量显著性降低，而miR-21-5P则显著性升高，CCK8、Transwell实验结果显示，当miR-21-5P过表达时，细胞的增殖、迁移和侵袭能力増强，反之细胞功能受到抑制。也就是说，miR-21-5P在食管恶性肿瘤中起着促癌基因的功能作用。通过生物信息学方法预测miR-21-5P的靶基因为BNC2，双荧光素酶实验结果表明miR-21-5P与野生型BNC2′-UTR靶向结合，qRT-PCR和WB实验结果表示在食管癌细胞中，当miR-21-5P过表达时，BNC2的表达量降低，当miR-21-5P被敲低时，BNC2的表达量升高。这些结果显示miR-21-5P与BNC2存在靶向关系。结论：在食管癌中，miR-21-5p直接靶向BNC2，其调节作用可能从而导致癌症的增殖迁移和侵袭作用。