“智三针”通过自噬途径抑制卒中后抑郁大鼠海马神经元炎性坏死的机制研究

摘要

目的：观察“智三针”对卒中后抑郁（PSD）模型大鼠海马神经元自噬、炎症水平的影响。方法：63只雄性SD大鼠随机分为7组，每组9只。除假手术组外，其余各组先构建大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO/R）模型，术后第4天起采用孤养联合CUMS 21 d构建缺血性PSD模型。造模24 h后，予针刺组“智三针”针刺干预，帕罗西汀组盐酸帕罗西汀（10 mg/kg）灌胃给药，假针刺组非穴不透皮假针干预，3-MA组自噬抑制剂3-MA(2.5 mg/kg)腹腔注射，3-MA+针刺组3-MA注射后针刺干预。1次/d，共14 d。神经功能缺损评分和糖水偏好率评估大鼠行为学，Western blot检测海马组织Beclin-1、BNIP3、LC3、NLRP3、NF-κB、IL-1β、IL-18蛋白表达，HE染色观察海马组织病理形态，透射电镜观察海马神经元超微结构和自噬小体。结果：造模后，与假手术组相比，模型组神经功能缺损加重（P<0.001），糖水偏好上升（P<0.01），海马Beclin-1、BNIP3、LC3、NLRP3、NF-κB、IL-1β、IL-18表达均升高（P<0.05）。干预后，与模型组相比，针刺组神经功能缺损改善（P<0.001），糖水偏好上升（P<0.001），海马Beclin-1、BNIP3、LC3表达升高（P<0.001）,NLRP3、NF-κB、IL-1β、IL-18表达降低（P<0.01）；帕罗西汀组神经功能缺损无显著差异（P>0.05），糖水偏好率上升（P<0.001）,Beclin-1、BNIP3、LC3表达升高（P<0.01）,NLRP3、NF-κB、IL-1β、IL-18表达降低（P<0.01）；假手术组及假针刺组各项指标均无显著差异（P>0.05）;3-MA组神经功能缺损加重（P<0.05），糖水偏好下降（P<0.05），海马Beclin-1、BNIP3、LC3表达降低（P<0.01）,NLRP3、NF-κB、IL-1β、IL-18表达均显著升高（P<0.01）；与3-MA组相比，3-MA+针刺组神经功能缺损改善（P<0.001），糖水偏好上升（P<0.001）,Beclin-1、BNIP3、LC3表达升高（P<0.001）,NLRP3、NF-κB、IL-1β、IL-18表达下降（P<0.01）;HE染色及透射电镜观察可见，假手术组海马神经元结构完整，未见自噬小体；PSD模型组和假针刺组海马神经元病理变化明显，自噬小体散在；药物组神经元细胞排列相对整齐，可见自噬小体；3-MA组海马神经元形态和结构破坏，可见单个自噬小体；针刺组和3-MA+针刺组海马神经元结构较完整，自噬小体典型可见。结论：“智三针”对缺血性PSD模型大鼠的神经功能损伤和抑郁行为有明显改善作用，其作用机制与激活海马神经元自噬，抑制神经元细胞炎性坏死，改善神经元结构有关。

关键词

缺血性卒中后抑郁 / 智三针 / 细胞自噬 / 炎性坏死