益气活血方介导巨噬细胞极化影响慢性难愈性创面的机制研究

摘要

目的：基于网络药理学、分子对接及细胞实验探究黄枫教授经验方益气活血方（YQHXF）介导巨噬细胞极化治疗慢性难愈性创面（CRW）的作用机制。方法：结合网络药理学和分子对接技术，分析并验证YQHXF影响CRW潜在靶点。CCK8检测YQHXF和LPS对Raw264.7巨噬细胞和增殖活性的影响，利用LPS建立RAW264.7细胞炎症模型，并加入JAK2信号通路激活剂香豆霉素a1(C-a1)和YQHXF含药血清干预，分组如下：Raw264.7组（对照组）、Raw264.7+LPS组（模型组）、Raw264.7+LPS+YQHXF组、Raw264.7+LPS+YQHXF+C-a1组、Raw264.7+LPS+C-a1组，流式细胞术检测Raw264.7细胞极化情况；RT-qPCR和ELISA检测炎症因子IL-4、IL-6、IL-13、TNF-α的转录及表达，Western Blot检测JAK2/STAT3通路磷酸化情况。结果：网络药理学与分子对接研究发现，YQHXF可能通过介导JAK2/STAT3信号通路调控巨噬细胞极化，调节炎症因子表达，促进CRW的愈合。细胞实验结果表明，YQHXF可显著提高巨噬细胞增殖活性（P<0.05）；模型组和C-a1组JAK2和STAT3磷酸化、M1型巨噬细胞比例、IL-6和TNF-α转录和蛋白表达明显高于对照组（P<0.05）；与模型组和C-a1组比较，加入YQHXF处理可显著降低JAK2和STAT3磷酸化、M1型巨噬细胞比例、IL-6和TNF-α转录和蛋白表达水平（P<0.05），提高M2型巨噬细胞比例、IL-4、IL-13转录和蛋白表达水平（P<0.05）。结论：YQHXF可能通过增强巨噬细胞增殖活性，抑制JAK2、STAT3磷酸化，正向调控巨噬细胞M2抗炎表型极化，抑制M1促炎表型极化，减轻炎症反应，达到对CRW的治疗效果。

关键词

名医经验 / 慢性难愈性创面 / 网络药理学 / 分子对接 / JAK2-STAT3 / 巨噬细胞极化