基于心肌细胞衰老研究EGCG对铁死亡的影响

摘要

目的：观察EGCG对心肌细胞衰老和铁死亡的影响。方法：使用不同浓度D-gal构建心肌细胞H9C2衰老模型，检测不同药物浓度作用不同时间下细胞的增殖活性；使用不同浓度EGCG预处理H9C2后再进行衰老模型构建，检测不同药物浓度作用不同时间下细胞的增殖活性；通过线粒体形态观察、亚铁离子(Fe²⁺)含量检测、活性氧（ROS）检测说明细胞内的铁死亡代谢改变；并进行细胞衰老β-半乳糖苷酶染色、免疫荧光、Western Blot检测细胞衰老蛋白p53、p21，以及铁死亡保护蛋白SCL7A11、GPX4。结果：D-gal对心肌细胞具有浓度依赖性和时间依赖性，呈负相关；EGCG浓度超过5μmol/L后与衰老的心肌细胞增殖活性呈负相关；衰老H9C2中细胞线粒体出现铁死亡特异性改变，且在用药后改善；衰老H9C2中Fe²⁺、ROS含量升高，使用EGCG后两者含量均大幅度降低；心肌细胞衰老程度越深，p53、p21蛋白水平升高，GPX4、SCL7A11蛋白水平降低；使用EGCG预处理后，GPX4、SCL7A11蛋白水平升高，p53、p21蛋白水平下降，荧光结果相同。结论：衰老的心肌细胞中铁死亡程度加重，EGCG可以抑制细胞的衰老以及铁死亡。

关键词

EGCG / 衰老 / 氧化应激 / 铁死亡 / 心肌细胞