玛瑙红樱桃花变绿病害病原鉴定及qPCR检测体系建立

何梅; 朱淑珠; 王雅丽; 王林; 李燏; 宋常美

doi:10.13938/j.issn.1007-1431.20240472

中国南方果树 ›› 2025, Vol. 54 ›› Issue (03) : 125 -131. DOI: 10.13938/j.issn.1007-1431.20240472

玛瑙红樱桃花变绿病害病原鉴定及qPCR检测体系建立

何梅, 朱淑珠, 王雅丽, 王林, 李燏, 宋常美

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摘要

为确定贵州玛瑙红樱桃花变绿病害病原分类地位及构建快速有效的检测体系，开展了研究。利用植原体16S rRNA基因引物R16m F2/R16m R1对感病玛瑙红樱桃总DNA进行常规PCR扩增、克隆和测序，通过同源性比较、系统进化分析和在线虚拟RFLP分析，确定其属于植原体16SrV-B亚组。根据16S rRNA基因设计并合成引物对MN16SF-2/MN16SR-2,用重组质粒pEASY-T1-MN16S为模板建立标准曲线，构建了玛瑙红樱桃花变绿植原体实时荧光定量PCR检测体系。运用该体系检测喷施了外源茉莉酸甲酯、褪黑素、四环素和未施外源物质的患病苗木体内植原体含量，发现施加外源物质组体内植原体含量与未施组相比均大幅下降。研究明确了玛瑙红樱桃花变绿植原体的分类地位并成功建立了qPCR检测体系，为玛瑙红樱桃植原体检测提供了技术支持。