蟹爪兰X病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

柏自琴; 郑乾明; 解璞; 罗会; 郑伟; 王正媛; 欧子艳; 奉皇书

doi:10.13938/j.issn.1007-1431.20250076

中国南方果树 ›› 2025, Vol. 54 ›› Issue (04) : 51 -55+61. DOI: 10.13938/j.issn.1007-1431.20250076

蟹爪兰X病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

柏自琴, 郑乾明, 解璞, 罗会, 郑伟, 王正媛, 欧子艳, 奉皇书

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摘要

蟹爪兰X病毒（zygocactus virus X,ZyVX）寄主广泛、发病率高、种传率高，在贵州火龙果主产区普遍发生。为实现对该病毒的精准检测测报，根据多个ZyVX分离株外壳蛋白（CP）的保守序列设计特异性引物，建立ZyVX实时荧光定量PCR方法，并利用该方法对贵州火龙果主产区罗甸、望谟、册亨、镇宁等4个县的田间40份疑似病毒病病样进行检测。结果表明，获得的靶标序列157 bp,建立了引物浓度150 nmol/L,退火温度61℃的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法，ZyVX的标准曲线方程为y=-3.343 3x+43.198（R²=0.998 3）,扩增效率为99.11%,对标准品的检测极限浓度为8×10～2拷贝/μL,其灵敏度是普通PCR的100倍。田间病样平均检出率为82.5%,与普通PCR检测结果一致。该方法灵敏度高、可靠性强，可用于ZyVX在植株及传播介体体内的快速准确诊断，为开展该病毒的监测、科学防控及从源头遏制病毒传播提供技术支撑，应用前景广阔。