沙棘叶多糖的分离、结构表征及生物活性研究

摘要

为给沙棘（Hippophae rhamnoides L.）资源的综合利用提供参考，本研究以沙棘叶为研究对象，采用水提醇沉法、大孔树脂及DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析法分离纯化得到一种中性多糖（HRLP?Ⅰ）和一种酸性多糖（HRLP?Ⅱ），探讨其结构及体外抗氧化活性。选用糖含量和得率较高的HRLP?Ⅱ，研究沙棘叶多糖对环磷酰胺诱导的免疫受抑小鼠脾脏的免疫调节作用的影响，结果表明，HRLP?Ⅰ含有较多的葡萄糖和半乳糖，而HRLP?Ⅱ的优势单糖为半乳糖和阿拉伯糖，二者均为杂多糖，均含有典型的多糖类红外吸收峰；高级结构表征结果显示HRLP?Ⅰ、HRLP?Ⅱ均无三螺旋结构，且二者显示出不同的表面形貌特征；热化学分析则表明HRLP?Ⅱ比HRLP?Ⅰ具有更好的热稳定性。体外抗氧化结果表明，HRLP?Ⅰ的2,2’?联氮?双(3?乙基苯并噻唑啉?6?磺酸（ABTS）、1,1?二苯基?2?三硝基苯肼（DPPH）、亚铁离子螯合和总还原能力均优于HRLP?Ⅱ，而HRLP?Ⅱ的羟自由基清除能力优于HRLP?Ⅰ。与模型组相比，HRLP?Ⅱ高剂量组（400 mg/kg BW）、中剂量组（200mg/kg BW）、低剂量组（100 mg/kg BW）能显著降低小鼠脾脏中IL?2、IL?6和TNF?α的表达（P<0.05），并能减轻小鼠脾脏组织淋巴结增生、红髓充血病变；升高CD4⁺/CD8⁺比值，减轻小鼠脾脏T淋巴细胞病变。综上，从沙棘叶中分离的多糖HRLP?Ⅱ可通过调节免疫受抑小鼠脾脏细胞因子表达、改善脾脏组织病变及T淋巴细胞平衡，发挥免疫调节作用。

关键词

沙棘叶 / 多糖 / 结构 / 抗氧化 / 免疫调节