诃子水提物通过上调PD-1/PD-L1表达调节胶原蛋白诱发关节炎(CIA)大鼠脾脏中细胞的细胞免疫减轻关节炎症

摘要

目的 研究诃子水提取物(TCWE)对胶原蛋白诱发关节炎(CIA)大鼠细胞免疫及程序性死亡蛋白1/程序性死亡蛋白1配体1(PD-1/PD-L1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、 CIA组、 TCWE处理组、甲氨蝶呤(MTX)处理组，每组15只。除对照组外，其余各组SD大鼠皮下注射Ⅱ型胶原蛋白制备胶原蛋白诱发关节炎(CIA)模型，TCWE组大鼠采用[20 mg/(kg·d)] TCWE处理，MTX组大鼠采用[1.67 mg/(kg·d)]MTX处理。处理14 d后，通过HE染色检查软骨形态，流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞凋亡和调节性T细胞(Treg)/Th17细胞比率，反转录PCR检测脾脏中的维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和叉头盒转录因子P3(FOXP3)、 PD-1和PD-L1的mRNA表达，免疫组织化学染色检测RORγt、 FOXP3的表达和定位。Western blot法检测脾脏淋巴细胞的PD-1和PD-L1的蛋白表达，ELISA检测大鼠血清白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β(TGF-β)水平。结果 与CIA组相比，TCWE组和MTX组的软骨和滑膜病变明显减轻，脾脏中的T淋巴细胞凋亡率增加，Treg/Th17细胞比率上调，RORγt的表达降低，FOXP3、 PD-1和PD-L1的表达增加。血清IL-17水平降低，血清TGF-β水平升高。结论 TCWE处理可能激活脾脏细胞的PD-1/PD-L1通路调节CIA大鼠脾脏中细胞的细胞免疫，减轻软骨损伤。

关键词

诃子水提取物 / 胶原蛋白诱发关节炎(CIA) / 软骨 / 细胞免疫 / 程序性细胞死亡蛋白1(PD-1) / 程序性细胞死亡蛋白1配体1(PD-L1)