多菌灵人工抗原的合成及其鼠源性多克隆抗体的制备

摘要

目的 合成多菌灵人工抗原，制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法 利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原，利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对人工抗原进行鉴定。用制备的人工抗原免疫小鼠获得抗多菌灵多克隆抗体，利用间接ELISA对抗体效价以及特异性进行测定。结果 成功制备多菌灵人工抗原。免疫小鼠后获得的抗体效价可达1∶12 800。抗体对多菌灵的半数抑制剂量(IC₅₀)为0.107μg/mL,且与苯菌灵、噻菌灵的交叉反应率均<1%。结论 成功获得高敏感性、高特异性的多克隆抗体，为多菌灵残留快速检测方法的建立奠定了基础。

关键词

多菌灵 / 人工抗原 / 多克隆抗体