3-脱氮腺苷(3-DAA)加速小鼠及仓鼠细胞日本脑炎病毒复制并下调炎症因子水平

摘要

目的 利用N⁶-甲基腺苷酸（m⁶A）甲基化修饰抑制剂3-脱氮腺苷（3-DAA）初步明确其对日本脑炎病毒（JEV）复制的影响。方法 JEV分别感染Neuro2a小鼠神经母细胞瘤细胞、 N9小鼠小胶质细胞和BHK幼仓鼠肾传代细胞，然后用3-DAA处理；在C57BL/6成年小鼠足底接种JEV,腹腔注射3-DAA。实时定量PCR检测细胞与小鼠脑组织中JEV,白细胞介素1β（IL-1β）、 IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶1（Arg1）、 α干扰素（IFN-α）、 IFN-β、 IFN-γ、 CXC趋化因子配体10 （CXCL10）的mRNA表达，Western blot法检测细胞及小鼠脑组织中JEV蛋白表达，观察小鼠生存情况，并通过HE染色检测小鼠脑部病理变化。结果 3-DAA可剂量依赖性的促进JEV在小鼠和仓鼠细胞及小鼠脑组织的核酸复制与蛋白表达，显著加速JEV感染小鼠的发病进程，降低小鼠生存率。3-DAA的处理下调IL-6、 TNF-α、 CXCL10、 IL-1β、 iNOS多种炎症因子的表达，免疫反应减弱。结论 3-DAA促进JEV感染，加速被感染细胞及小鼠死亡，提示m⁶A修饰可能对JEV复制起负向调控作用。

关键词

3-脱氮腺苷（3-DAA） / N⁶-甲基腺苷酸（m⁶A） / 日本脑炎病毒（JEV） / 复制