LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡

摘要

目的 研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2) V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用，以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法 采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变；应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类；采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖；采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率；采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果 在JAK2 V617F突变的HEL细胞中，LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、 STAT1、 STAT3、 STAT5、 AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平，并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达，而对BAX的表达水平未见显著影响；LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖，促进HEL细胞凋亡。结论 在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中，LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化，进而抑制HEL细胞的增殖，促进细胞凋亡。

关键词

骨髓增殖性肿瘤 / 白细胞相关免疫球蛋白样受体1 (LAIR-1) / JAK2 V617F突变 / Janus激酶(JAK) / 信号转导子与转录激活子(STAT) / 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) / 蛋白激酶B(AKT)