有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立

摘要

目的 建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法 N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原；制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记；优化试纸条工作参数，并进行性能测试。结果 抗血清效价在1∶32～1∶64之间，蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量（M_r）25 000和55 000处出现目的条带，纯度较好；试纸条反应时间在5～10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好，试纸条有效期为6个月。结论 建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法，适合大量样本的现场初筛。

关键词

乙酰胆碱酯酶 / 多克隆抗体 / 有机磷农药 / 胶体金试纸条 / 免疫层析法