NLRC3通过抑制STING信号通路，减轻类风湿关节炎患者巨噬细胞焦亡诱导的免疫炎症反应

摘要

目的 探索含胱天蛋白酶激活和募集结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体3(NLRC3)在RA患者巨噬细胞焦亡诱导的免疫炎症反应中的作用及潜在的机制。方法 按照入组标准选取50名类风湿关节炎(RA)患者和10名健康志愿者，提取外周血巨噬细胞，根据分组要求进行转染处理，分为正常健康对照(NC)组、 RA巨噬细胞模型(RA-MC)组、 RA巨噬细胞模型联合NLRC3过表达(RA-MC联合pcDNA3.1-NLRC3)组、 RA巨噬细胞模型联合NLRC3敲低(RA-MC联合siRNA-NLRC3)组、 RA巨噬细胞模型联合干扰素基因刺激因子(STING)过表达(RA-MC联合pcDNA3.1-STING)组、 RA巨噬细胞模型联合STING敲低(RA-MC联合siRNA-STING)组，采用透射电镜观察各组巨噬细胞焦亡的情况，实时定量PCR检测各组巨噬细胞中NLRC3、 STING、胱天蛋白酶1(caspase-1)、消皮素D(GSDMD)的mRNA表达，ELISA测定各组巨噬细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-18的水平。结果 与NC组相比，RA-MC组中巨噬细胞表现出细胞焦亡的特点；与RA-MC组相比，RA-MC联合pcDNA3.1-NLRC3组和RA-MC联合siRNA-STING组中细胞焦亡情况改善，RA-MC联合siRNA-NLRC3组和RA-MC联合pcDNA3.1-STING组中细胞焦亡情况加重；与NC组相比，RA-MC组中STING、 caspase-1、 GSDMD的mRNA相对表达水平升高，炎症因子IL-1β、IL-18的水平也升高，而NLRC3的mRNA相对表达水平降低；与RA-MC组相比，RA-MC联合pcDNA3.1-NLRC3组和RA-MC联合siRNA-STING组中caspase-1、 GSDMD的mRNA相对表达水平降低，炎症因子IL-1β、IL-18的水平也降低，RA-MC联合siRNA-NLRC3组和RA-MC联合pcDNA3.1-STING组的情况则与之相反；同样与RA-MC组相比，RA-MC联合pcDNA3.1-NLRC3组中STING的mRNA相对表达水平会降低，RA-MC联合siRNA-NLRC3组中STING的mRNA相对表达水平升高。结论 NLRC3可通过抑制STING信号通路，减少caspase-1、 GSDMD焦亡蛋白的产生，进而拮抗巨噬细胞焦亡，降低炎症因子IL-1β、 IL-18的水平，从而减轻RA患者的免疫炎症反应。

关键词

类风湿关节炎(RA) / 含胱天蛋白酶激活和募集结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体3(NLRC3) / 干扰素基因刺激因子(STING)信号通路 / 巨噬细胞焦亡 / 免疫炎症反应