Anti-GM1影响裸鼠NK细胞分化和杀伤活性研究

摘要

目的 研究抗单唾液酸神经节苷脂抗体(Anti-GM1)通过调节自然杀伤(NK)细胞分化，抑制裸鼠NK细胞的自然杀伤活性。方法 多重免疫荧光染色鉴定人肾癌组织中NK细胞的分型特点。选择雄性BALB/c小鼠6只，GM1皮下注射每周1次，一共三周，以此来免疫小鼠制备Anti-GM1。选取6只BALB/c-Nude裸鼠，采用随机数字表法将裸鼠分为对照组(CON组)及实验组(Anti-GM1组), CON组用IgG连续腹腔注射7 d; Anti-GM1组用Anti-GM1连续腹腔注射7 d。7 d后经颈椎脱臼法处死裸鼠，取裸鼠脾脏并制成单细胞悬液，将脾细胞与YAC-1细胞共培养4 h。用LDH法检测NK细胞的杀伤活力。使用流式细胞术进行检测，根据CD27和CD11b表达来界定NK细胞亚群，同时检测CD107a的表达情况。ELISA检测NK细胞的γ干扰素(IFN-γ)及颗粒酶B(GzmB)分泌水平。结果 人肾癌组织标本中有明显的NK细胞浸润现象，并且GzmB也呈现阳性表达。Anti-GM1可以显著抑制NK细胞的杀伤活力。与CON组相比，Anti-GM1组可以促进NK细胞向成熟亚群进行分化。Anti-GM1组NK细胞的CD107a水平显著下降。Anti-GM1组NK细胞的IFN-γ及GzmB分泌水平较CON组下降。结论 NK细胞可以浸润在人肾癌组织中，并且能够分泌GzmB,发生自然杀伤作用。Anti-GM1可以促进NK细胞的成熟，但抑制NK细胞的杀伤活力，与其抑制NK细胞CD107a表达和抑制NK细胞的IFN-γ及GzmB分泌有关。

关键词

Anti-GM1 / NK细胞 / 免疫治疗 / 免疫反应