M2型巨噬细胞抑制CD8⁺T细胞促进食管癌细胞恶性生物行为

摘要

目的 探讨M2型巨噬细胞通过抑制CD8⁺T细胞的抗肿瘤能力参与食管癌的恶性生物学行为的作用。方法 利用佛波酯（PMA）联合白细胞介素4（IL-4）/IL-13将人单核细胞白血病细胞（THP-1）诱导为M2型巨噬细胞并用实时定量PCR检测相关炎性因子。运用磁珠分选法分选健康志愿者外周血CD8⁺T细胞，用流式细胞术验证分选纯度。构建CD8⁺T细胞与食管鳞癌细胞的非接触性共培养体系（CD8⁺T细胞）,和构建M2型巨噬细胞、 CD8⁺T细胞与食管鳞癌细胞的非接触性共培养体系（M2型巨噬细胞联合CD8⁺ T细胞）。平板克隆实验和CCK-8细胞毒性实验检测各组肿瘤细胞增殖能力。Transwell^TM实验检测各组肿瘤细胞侵袭和迁移能力。流式细胞术检测并分析各组肿瘤细胞的凋亡情况。运用GraphPadPrism9.5软件进行统计学分析和制图。结果 诱导后巨噬细胞IL-10和精氨酸酶1（Arg1）表达上调，IL-12和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达下降，具有M2表型巨噬细胞特征。磁珠分选法成功的分选出CD8⁺T细胞，其阳性率>90%。食管鳞癌细胞与CD8⁺T细胞非接触性共培养组的增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力显著低于单独癌细胞组；而食管鳞癌细胞与M2型巨噬细胞条件培养基预处理CD8⁺T细胞共培养后，其增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力与食管鳞癌和CD8⁺T细胞共培养组相比显著增强。结论 M2型巨噬细胞通过抑制CD8⁺T细胞的抗肿瘤能力促进食管鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移和抗凋亡。

关键词

M2型巨噬细胞 / CD8⁺T细胞 / 食管鳞癌 / 肿瘤微环境（TME） / 非接触性共培养