新风胶囊含药血清通过调控环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB)影响类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡

摘要

目的 探讨新风胶囊(XFC)含药血清通过调控环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB)对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的影响。方法 XFC灌胃大鼠，制备含药血清。人RA-FLS来源于RA患者滑膜组织，用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激RA-FLS建立模型。构建pcDNA3.1-circ-CBLB及阴性对照，分别转染至RA-FLS中。实验分为对照组、 TNF-α处理的RA-FLS组、 XFC处理的RA-FLS组、 pcDNA3.1-circ-CBLB-NC转染的RA-FLS组(过表达空转组)、 pcDNA3.1-circ-CBLB转染的RA-FLS组(过表达组)、 pcDNA3.1-circ-CBLB联合XFC处理的RA-FLS组(过表达给药组)。采用CCK-8法检测细胞活力，采用流式细胞术检测细胞周期与凋亡，采用实时定量PCR检测circ-CBLB表达水平，采用ELISA检测抗炎因子白细胞介素4(IL-4)、 IL-10,促炎因子IL-6、 TNF-α水平。结果 XFC最佳含药血清量为200 mL/L,处理时间为72 h;与同一时间模型组相比，XFC组、过表达组、过表达给药组的细胞活力均下降。与模型组比较，XFC组、过表达组、过表达给药组circ-CBLB表达水平升高、凋亡率升高，S期和G2期细胞比例增加，IL-4、 IL-10含量升高，IL-6、 TNF-α含量降低。结论 XFC处理上调RA-FLS中circ-CBLB表达，提高抗炎因子的水平，降低促炎因子的水平，抑制RA-FLS的细胞活力，提高其凋亡率，延长细胞周期，抑制RA-FLS增殖并促进其凋亡。

关键词

新风胶囊(XFC) / 环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB) / 成纤维细胞样滑膜细胞(FLS) / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 细胞因子