贝母素乙调节FOXO3-FOXM1信号轴对卵巢癌生物学行为和化疗耐药性的影响

摘要

目的 探讨贝母素乙（PMI）调节叉头框蛋白O3（FOXO3）-叉头框转录因子M1（FOXM1）信号轴对卵巢癌增殖、侵袭、迁移、凋亡和化疗耐药性的影响。方法 以卵巢癌SKOV3细胞、 SKOV3/顺铂（DDP）细胞为研究对象，MTT法检测DDP对SKOV3细胞、 SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况以及PMI对SKOV3/DDP细胞的增殖抑制情况；将SKOV3/DDP细胞分为对照组（正常培养）、 DDP组（20μg/mL DDP）、L-PMI组、 M-PMI组、 H-PMI组（20μg/mL DDP联合50、 100、 200μmol/L PMI）、甘珀酸（CBX）组（20μg/mL DDP和200μmol/L PMI联合50 ng/mL CBX）。平板克隆实验检测SKOV3/DDP细胞的增殖；Transwell^TM实验检测SKOV3/DDP细胞的侵袭和迁移；流式细胞术检测SKOV3/DDP细胞的凋亡率；Western blot法检测SKOV3/DDP细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、胱天蛋白酶3（caspase-3）、多药耐药相关蛋白5抗体（MRP5）、 FOXO3、 FOXM1蛋白表达量。结果 SKOV3细胞和SKOV3/DDP细胞增殖抑制率在DDP干预下以浓度依赖性的方式显著增加，且SKOV3细胞的增殖抑制率高于SKOV3/DPP细胞。SKOV3/DDP细胞增殖抑制率在PMI干预下以浓度依赖性的方式显著增加。DDP组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、 PCNA、 MRP5、 FOXM1蛋白表达低于对照组，凋亡率、 caspase-3、 FOXO3蛋白表达高于对照组；与DDP组比较，L-PMI组、 M-PMI组、 H-PMI组的克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、 PCNA、 MRP5、 FOXM1蛋白表达显著下降，凋亡率、 caspase-3、 FOXO3蛋白表达显著上升；CBX组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、 PCNA、 MRP5、 FOXM1蛋白表达显著高于H-PMI组，凋亡率、 caspase-3、 FOXO3蛋白表达显著低于H-PMI组。结论 PMI可能是通过激活FOXO3,抑制FOXM1,进而抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移和化疗耐药。

关键词

贝母素乙 / 叉头框蛋白O3 / 叉头框转录因子M1 / 卵巢癌 / 肿瘤免疫微环境