IL-6经NF-κB信号通路上调人胎盘MSC SPP1表达促进M2型巨噬细胞极化的作用机制研究

摘要

目的 探究白细胞介素6(IL-6)调控人胎盘来源间充质干细胞(MSC)分泌型磷酸蛋白1(SPP1)表达，影响巨噬细胞极化的分子机制。方法 利用酶消化法及成分明确的无血清培养基制备出人胎盘来源间充质干细胞(hfPMSC),形态学观察，流式细胞仪检测MSC表面标志分子CD14、 CD34、 CD45、 CD73、 CD90、 CD105、人类白细胞抗原DR(HLA-DR)的表达；利用终剂量100 ng/mL的IL-6处理hfPMSC 24 h, ELISA、 Western blot法和实时定量PCR在蛋白和mRNA表达水平上检测SPP1的表达；将IL-6处理感染SPP1干扰慢病毒的hfPMSC与80 ng/mL佛波酯(PMA)联合100 ng/mL脂多糖(LPS)诱导活化的THP-1巨噬细胞共培养，流式细胞术检测THP-1细胞CD11c和CD206的阳性细胞比例；利用IL-6和/或核因子κB p65(NF-κB p65)特异性抑制剂SC75741处理hfPMSC, Western blot法检测NF-κB信号通路与SPP1的表达。结果 IL-6显著上调hfPMSC SPP1蛋白及mRNA的表达水平；干扰SPP1显著下调hfPMSC SPP1的表达，显著降低共培养巨噬细胞CD206阳性的细胞比率；IL-6显著上调hfPMSC p-p65的表达，激活NF-κB信号通路；SC75741显著下调经IL-6处理hfPMSC中p-p65和SPP1的蛋白表达水平。结论 IL-6经NF-κB信号通路上调hfPMSC SPP1的表达，增强其诱导巨噬细胞向M2型极化的作用。

关键词

人胎盘来源间充质干细胞(hfPMSC) / IL-6 / SPP1 / 巨噬细胞极化