p38磷酸化作用对PANC-1细胞干性维持及化疗药物耐药性的影响

摘要

目的 本研究旨在探讨p38对胰腺癌干细胞干性维持的作用影响。方法 利用不同浓度的5-氟尿嘧啶（5-FU）(0.5×IC₅₀、 IC₅₀、 2×IC₅₀)处理人胰腺癌PANC-1细胞24 h,加入VX-702（p38磷酸化抑制剂）,将细胞接种在超低黏附性6孔培养皿中观察肿瘤的球形变化。流式细胞术检测评估细胞周期、凋亡以及CD44和CD133阳性细胞的比例。利用Western blot法检测细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、细胞周期蛋白B1和D1、八聚体结合转录因子4（OCT4）、 SRY-box转录因子2（SOX2）、 Nanog同源框（Nanog）基因和p38蛋白（p38）的表达水平；通过反转录PCR测定p38、 OCT4、 Nanog和SOX2 mRNA表达水平。结果 5-FU通过抑制PANC-1细胞肿瘤球形成，降低CD44和CD133阳性细胞的表达水平，下调OCT4、 Nanog和SOX2表达抑制PANC-1细胞肿瘤干细胞（CSC）干性维持；当PANC-1细胞的磷酸化作用被高选择性p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）抑制剂VX-702抑制，其作用与5-FU治疗作用相同；当VX-702联合5-FU治疗PANC-1细胞可以加强治疗效果。结论 p38抑制剂降低PANC-1细胞活性，增加细胞凋亡；p38抑制剂抑制胰腺癌肿瘤干细胞的干性维持作用。

关键词

PANC-1细胞 / 肿瘤球形成 / 肿瘤干细胞(CSC) / 肿瘤标记因子 / p38 / 细胞凋亡