外泌体lncRNA HOTAIR促进食管癌恶性转移的潜在分子机制研究

摘要

目的 阐明食管癌相关成纤维细胞（CAF）来源外泌体（Exo）携带HOX转录本反义基因RNA（lncRNA HOTAIR）促进食管鳞状细胞癌（ESCC）转移的分子机制。方法 从肿瘤组织中收集CAF,和从距离肿瘤至少5 cm的邻近正常组织中获得非癌相关成纤维细胞（NF）。将从CAF或NF收集的条件培养基中分离Exo（CAF-Exo和NF-Exo）,将CAF-Exo和NF-Exo与人ESCC细胞系TE-1细胞一起孵育24 h,CCK-8法检测细胞增殖能力，划痕实验、 Transwell^TM实验检测细胞的侵袭和迁移能力。将TE-1细胞分为以下2组：NC组和KD组。NC组和KD组分别转染对照siRNA和靶向HOTAIR的siRNA。测定HOTAIR敲低对细胞增殖、侵袭、迁移、糖酵解的影响。结果 CAF-Exo比NF-Exo更显著地促进TE-1细胞的增殖。与NF-Exo组相比，CAF-Exo处理的TE-1细胞的侵袭和迁移能力显著提高。此外，CAF-Exo处理抑制了上皮钙黏蛋白（E-cadherin）的表达并增强了神经钙黏蛋白（N-cadherin）的表达。HOTAIR在CAF中的表达显著高于NF中的表达。与NF-Exo相比，CAF-Exo中HOTAIR的表达水平也显著上调。与NC组相比，KD组TE-1细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低。与NC组相比，KD组TE-1细胞中作为糖酵解的关键限速酶的己糖激酶2（HK2）、细胞外酸化率（ECAR）和三磷酸腺苷/二磷酸腺苷（ATP/ADP）比率显著下调。结论CAF来源Exo的HOTAIR可能通过调节ESCC细胞中糖酵解参与转移和上皮间质转化（EMT）。

关键词

食管癌 / 食管癌相关成纤维细胞(CAF) / lncRNA HOTAIR / 糖酵解