驼源天然噬菌体纳米抗体文库的构建及抗CD22纳米抗体的筛选

摘要

目的 筛选出抗CD22特异性纳米抗体，为其作为免疫治疗制剂提供基础。方法 构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，分析其多样性。以生物素化CD22抗原为靶点，进行3轮生物素链霉亲和素液相筛选法，初步通过ELISA和基因测序鉴定抗CD22纳米抗体序列。结果 经测定，构建的噬菌体纳米抗体展示文库容量为3.89×10～9 CFU/mL,插入有效片段高于85%。基于此文库，初步筛选出7条抗CD22纳米抗体，其氨基酸序列比对结果显示，整体相似性为70.34%,均为亲水性蛋白。蛋白-蛋白复合物对接预测结果表明，5条纳米抗体序列的模拟蛋白都可以配对连接到CD22,主要作用力为疏水相互作用和氢键。结论 本研究为靶向CD22的嵌合抗原受体T细胞的研究提供基础，成功构建天然噬菌体纳米抗体展示文库，获得5条抗CD22特异性的纳米抗体。

关键词

CD22 / 纳米抗体 / 噬菌体展示文库