慢性淋巴细胞白血病中2型固有淋巴细胞通过IL-9对Treg及CD8⁺T细胞功能的影响

摘要

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）中2型固有淋巴细胞（ILC2）及白细胞介素9（IL-9）与对照组之间的差异，了解ILC2通过IL-9对调节性T细胞（Treg）、 CD8⁺T细胞及CLL细胞功能的影响。方法 流式细胞术检测45例初诊CLL患者及24例健康对照者外周血ILC2、 Treg水平，检测其中28例患者及15例健康对照者外周血CD8⁺T细胞内颗粒酶B及穿孔素水平；ELISA检测血清中IL-9水平。免疫磁珠分选患者与健康对照者ILC2细胞后分别培养，ELISA测两组培养上清中IL-9水平。磁珠分选CLL患者ILC2与健康对照外周血单个核细胞（PBMC）,并加入人慢性B细胞白血病（MEC-1）细胞共培养，其中一组加入IL-9抗体，另一组不加。培养72 h后流式细胞术分别测两组Treg比例、 Treg上程序性死亡受体1（PD-1）、 T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白（TIGIT）、细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）, CD8⁺T细胞内颗粒酶B、穿孔素；ELISA检测培养上清的IL-9水平；AnnexinⅤ-PI法测MEC-1细胞凋亡。结果 与健康对照组相比，CLL组ILC2、 Treg、 IL-9水平增加明显；CLL患者外周血CD8⁺T细胞的颗粒酶B及穿孔素水平呈正相关；分选ILC2培养后CLL组培养上清IL-9水平较正常对照组上升。细胞实验中，加入IL-9抗体组Treg上PD-1、 TIGIT水平明显下降，CD8⁺T细胞内颗粒酶B水平明显上升；加入IL-9抗体组培养上清ELISA结果提示IL-9水平明显下降。加入IL-9抗体组MEC-1细胞早期凋亡细胞比例明显增加。结论 在CLL中，ILC2通过IL-9对CD8⁺T细胞及Treg均有影响，可减弱CD8⁺T细胞抗肿瘤作用，增强Treg的免疫抑制作用，在CLL疾病发生发展中发挥作用。

关键词

2型固有淋巴细胞（ILC2） / 慢性淋巴细胞白血病（CLL） / 白细胞介素9（IL-9） / 调节性T细胞（Treg） / CD8⁺T细胞