基于RhoA/ROCK通路探讨黄芩苷对妊娠期糖尿病大鼠血脂代谢及免疫功能的影响

摘要

目的 探讨黄芩苷对妊娠期糖尿病（GDM）大鼠血脂代谢及免疫功能的影响与机制。方法 将给予高脂高糖饲料喂养的雌性大鼠和喂食普通饲料的雄性大鼠同笼制备孕鼠，并采用腹腔注射链脲佐菌素（35 mg/kg）构建GDM大鼠模型。将GDM大鼠随机分为模型组、法舒地尔（FA）(RhoA/ROCK抑制剂)组（10 mg/kg）、黄芩苷低（100 mg/kg）剂量组、黄芩苷高（200 mg/kg）剂量组、高剂量黄芩苷联合LPA（RhoA/ROCK激活剂）组（200 mg/kg黄芩苷+1 mg/kgLPA）,每组12只；另取12只同批高糖高脂饲养的妊娠期大鼠为对照组。各组大鼠给予相应药物干预2周后，血糖仪检测空腹血糖（FBG）水平；ELISA检测血清空腹胰岛素（FINS）水平，计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;试剂盒检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平以及外周血肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和IL-10水平；HE染色观察肝组织病理学变化；流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群比例；实时定量PCR、 Western blot法检测肝组织Ras同源物家族成员A（RhoA）、 Rho相关卷曲蛋白激酶1（ROCK1）、 ROCK2的mRNA和蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组FBG、 FINS和HOMA-IR、血清ALT、 AST、 TG、 TC、 LDL-C水平、外周血TNF-α、 IL-6水平、 CD8⁺T细胞百分比、肝组织RhoA、 ROCK1、 ROCK2的mRNA和蛋白表达升高，血清HDL-C水平、外周血IL-10水平、 CD3⁺T细胞、 CD4⁺T细胞百分比和CD4⁺T细胞/CD8⁺T细胞比值降低；与模型组相比，FA组、黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组FBG、 FINS和HOMA-IR、血清ALT、 AST、 TG、 TC、 LDL-C水平、外周血TNF-α、 IL-6水平、 CD8⁺T细胞百分比、肝组织RhoA、 ROCK1、 ROCK2的mRNA和蛋白表达降低，血清HDL-C、外周血IL-10水平、 CD3⁺T细胞、 CD4⁺T细胞和CD4⁺T细胞/CD8⁺T细胞比值升高；LPA可明显减弱黄芩苷对GDM大鼠血脂代谢和免疫功能的改善作用。结论 黄芩苷可能通过抑制RhoA/ROCK通路，改善GDM大鼠血脂代谢和免疫功能。

关键词

黄芩苷 / 妊娠期糖尿病(GDM) / 血脂代谢 / 免疫功能 / Ras同源物家族成员A(RhoA) / Rho相关卷曲蛋白激酶1(ROCK1)