泛素特异性肽酶21增加FOXM1稳定性促进子宫内膜异位症巨噬细胞M2极化的机制研究

摘要

目的 探究泛素特异性肽酶21(USP21)增加叉头框蛋白M1(FOXM1)稳定性促进子宫内膜异位症(EM)巨噬细胞M2极化的机制研究。方法 收集子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜基质细胞(EESC)和常规健康评估者正常子宫内膜基质细胞(NESC)进行体外培养，实时定量PCR及Western blot法检测细胞中USP21和FOXM1表达水平。将EESC与巨噬细胞共培养，实时定量PCR检测M1极化标志物白细胞介素6(IL-6)、 CXC趋化因子配体10(CXCL10)和M2极化标志物CD206、纤连蛋白1(FN1),流式细胞术检测M2标志物CD206, ELISA检测细胞上清液IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-10、转化生长因子β(TGF-β)水平，免疫共沉淀检测USP21与FOXM1相互作用及FOXM1泛素化水平，放线菌酮(CHX)实验检测FOXM1蛋白稳定性。结果 与NESC组相比，EESC组细胞中USP21和FOXM1表达水平显著升高；与NESC联合M0组相比，EESC联合M0组细胞中M1极化标志物(IL-6、 CXCL10)表达无显著差异，M2极化标志物(CD206、 FN1)表达升高，M2巨噬细胞数量显著增多，细胞上清液IL-6和TNF-α水平无显著差异，IL-10和TGF-β水平升高，以上表明去泛素化酶USP21在EM中高表达，促进巨噬细胞M2极化。敲低USP21或FOXM1均能抑制EM巨噬细胞M2极化。EESC中USP21与FOXM1存在相互作用，FOXM1泛素化水平下降，FOXM1蛋白稳定性增强。过表达FOXM1逆转敲低USP21对EM巨噬细胞M2极化的抑制作用。结论 去泛素化酶USP21与FOXM1相互作用，增加FOXM1稳定性，促进EM巨噬细胞M2极化。

关键词

巨噬细胞M2极化 / 子宫内膜异位症(EM) / 泛素特异性肽酶21(USP21) / 叉头框蛋白M1(FOXM1) / 去泛素化