结核分枝杆菌PPE59蛋白通过调控耻垢分枝杆菌感染巨噬细胞的细胞因子分泌促进其在宿主细胞的存活

摘要

目的 研究结核分枝杆菌(Mtb)脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸-59(PPE59)对耻垢分枝杆菌(Ms)生物学功能及调控宿主细胞免疫应答的影响。方法 通过PCR扩增获得PPE59基因片段，将其克隆至pALACE,构建重组pALACE-PPE59载体，电转化至Ms;采用Western blot法对PPE59表达进行鉴定和亚细胞定位分析。分析Ms＿Vec和Ms＿PPE59在低酸(pH=3和pH=5)条件和表面活性压力十二烷基硫酸钠(SDS)条件的存活能力，以及其在巨噬细胞内存活率。ELISA检测Ms＿Vec和Ms＿PPE59感染巨噬细胞后，白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、 IL-12和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 IL-10分泌水平。结果 PPE59蛋白定位于Ms细胞壁，可增强Ms的耐酸作用和抗SDS作用，有利于Ms在巨噬细胞内的存活；PPE59显著降低促炎细胞因子IL-1β、 IL-6、 IL-12和TNF-α的分泌，促进抑炎因子IL-10的分泌。结论 PPE59能增强Ms对低酸和SDS压力条件下的存活能力，通过调控细胞因子分泌水平促进其在细胞内的存活。

关键词

免疫应答 / 结核分枝杆菌(Mtb) / 耻垢分枝杆菌(Ms) / 脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸-59(PPE59) / Rv3429 / 生物学功能