慢性阻塞性肺病继发真菌性肺炎患者中白细胞介素36γ水平升高对CD8⁺T细胞功能的调控作用

摘要

目的 观察慢性阻塞性肺病（COPD）继发真菌性肺炎患者白细胞介素36γ （IL-36γ）的表达，分析IL-36γ对COPD继发真菌性肺炎患者CD8⁺T细胞活性的影响。方法 采集47例COPD患者、 39例COPD继发真菌性肺炎患者、 20例对照者的外周血，采集27例COPD继发真菌性肺炎患者支气管肺泡灌洗液（BALF）,纯化CD8⁺T细胞。ELISA检测血浆和BALF中4种IL-36亚型表达。使用重组人IL-36γ刺激CD8⁺T细胞，ELISA检测培养上清中γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、穿孔素和颗粒酶B水平。重组人IL-36γ刺激的CD8⁺T细胞与NCI-H1882细胞直接接触或Transwell^TM共培养，检测培养上清中IFN-γ、 TNF-α、乳酸脱氢酶水平，计算靶细胞死亡比例。结果 COPD组和COPD继发真菌性肺炎组血浆IL-36α、 IL-36β、 IL-36γ水平均高于对照组，但仅血浆IL-36γ水平在COPD继发真菌性肺炎组高于COPD组[（200.11±99.95）pg/mL vs（153.03±87.18）pg/mL,P=0.023],血浆IL-36受体拮抗剂在三组之间的差异无统计学意义。COPD继发真菌性肺炎患者中，感染部位BALF中IL-36γ水平高于非感染部位[（305.82±59.60）pg/mL vs（251.93±76.01）pg/mL,P=0.011]。IL-36γ刺激后CD8⁺T细胞分泌IFN-γ、 TNF-α、穿孔素和颗粒酶B水平均高于无刺激组。IL-36γ刺激后的CD8⁺T细胞与人肺癌细胞系NCI-H1882直接混合培养后，细胞死亡比例升高[（16.06±3.67）%vs（11.47±2.36）%,P=0.002],但使用Transwell^TM平板进行非接触培养时，IL-36γ刺激的CD8⁺T细胞诱导NCI-H1882细胞死亡比例与无刺激比较无明显变化[（4.77±0.78）%vs（4.99±0.92）%,P=0.554]。结论 COPD继发真菌性肺炎患者血浆和感染部位IL-36γ水平升高，可增强外周血和感染微环境中CD8⁺T细胞杀伤功能。

关键词

CD8⁺T细胞 / 慢性阻塞性肺病（COPD） / 真菌 / 白细胞介素36γ