黄芪甲苷IV调控Snail1乳酸化和乙酰化介导巨噬细胞极化改善大鼠心肌梗死

摘要

目的 探讨黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ)通过调控Snail1乳酸化和乙酰化以及转化生长因子β(TGF-β)通路以巨噬细胞依赖性机制对心肌梗死(MI)进展的影响。方法 采用氧葡萄糖剥夺(OGD)处理H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌缺血模型，并使用AS-Ⅳ处理。CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，乳酸脱氢酶(LDH)释放实验评估细胞损伤。使用脂多糖(LPS)处理小鼠RAW246.7细胞，ELISA检测培养基上清液中乳酸的水平，Western blot法检测巨噬细胞表型标志物的表达。将RAW246.7细胞条件培养基(CM)与H9c2细胞共培养，评估AS-Ⅳ对巨噬细胞CM介导的H9c2细胞损伤的保护作用。使用LPS(100 ng/mL)联合IFN-γ(20 ng/mL)诱导RAW246.7细胞分化为M1样巨噬细胞，在M1巨噬细胞中过表达Snail1,并使用转染Snail1后的M1巨噬细胞CM与H9c2细胞共培养，验证AS-Ⅳ在心肌梗死中的作用机制。采用左冠状动脉前降支(LAD)结扎建立MI大鼠模型，并使用AS-Ⅳ治疗。超声心动图检测大鼠心功能、 TUNEL染色检测心肌细胞凋亡、 HE染色观察心脏组织病变情况。结果 与OGD组相比，AS-Ⅳ处理促进细胞活力，减少细胞凋亡和LDH的释放。LPS上调RAW246.7细胞培养基上清液中乳酸的水平并诱导RAW246.7细胞极化为M1表型。AS-Ⅳ减弱RAW246.7细胞CM对H9c2细胞的损伤作用。在M1巨噬细胞中过表达Snail1后减弱AS-Ⅳ对H9c2细胞的保护作用。体内研究结果表明，相对于MI组，AS-Ⅳ治疗后降低MI大鼠心脏组织中乳酸水平，改善大鼠心功能和心肌损伤，减轻大鼠心肌细胞凋亡。结论 AS-Ⅳ通过抑制Snail1乳酸化和乙酰化抑制TGF-β通路激活以巨噬细胞依赖性方式抑制MI后心肌细胞损伤。

关键词

黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ) / 心肌梗死 / Snail1 / 巨噬细胞 / 乳酸化 / 乙酰化