miR-582-5p调控DUSP1对结核分枝杆菌感染巨噬细胞的影响

摘要

目的 探讨miR-582-5p调控双特异性磷酸酶1 （DUSP1）对结核分枝杆菌（Mtb）感染巨噬细胞的影响。方法 将巨噬细胞THP-1细胞分为Control组、 Mtb组、 inhibitor-NC组、 miR-582-5p inhibitor组、 miR-582-5p inhibitor联合si-NC组、 miR-582-5p inhibitor联合si-DUSP1组；实时定量PCR检测细胞miR-582-5p、 DUSP1基因表达；ELISA试剂盒检测γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、 IL-1β水平；CCK-8法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot法检测细胞中DUSP1、 B细胞淋巴瘤因子2（Bcl2）、 Bcl2相关X蛋白（BAX）、裂解型胱天蛋白酶3（c-caspase-3）蛋白表达；验证miR-582-5p与DUSP1的靶向关系。结果 与Control组相比，Mtb组巨噬细胞miR-582-5p表达、 IFN-γ、 IL-6、 TNF-α、 IL-1β水平、细菌负荷量、 A₄₅₀值（24 h、 48 h）、 Bcl2蛋白表达升高，DUSP1 mRNA表达、凋亡率、 c-caspase-3、 BAX和DUSP1蛋白表达降低；与Mtb组和inhibitor-NC组相比，miR-582-5p inhibitor组上述指标被部分逆转；下调DUSP1表达可部分逆转下调miR-582-5p表达对Mtb感染巨噬细胞的抑制作用。结论 抑制miR-582-5p表达可上调DUSP1表达，进而抑制Mtb感染巨噬细胞增殖和炎性反应，促进细胞凋亡。

关键词

miR-582-5p / DUSP1 / 结核分枝杆菌(Mtb) / 巨噬细胞 / 增殖 / 凋亡 / 炎性反应