葫芦素B抑制cGAS-STING信号通路缓解银屑病小鼠皮肤损伤和炎症

摘要

目的 基于环状GMP-AMP合酶-干扰素基因刺激因子(cGAS-STING)信号通路探索葫芦素B(CucB)对银屑病小鼠皮肤损伤和炎症的作用。方法 分析基因表达数据集(GEO)数据库银屑病患者皮损与非病变皮肤的cGAS-STING信号相关基因表达特征；细胞计数CCK-8试剂盒评估CucB的细胞毒性，Western blot法、实时定量PCR、 ELISA检测不同浓度CucB处理组细胞的cGAS-STING通路相关蛋白、基因表达和炎性细胞因子分泌；建立咪喹莫特(IMQ)诱导的BALB/c小鼠银屑病模型，设置正常组、模型组、 CucB低剂量组[0.1 mg/(kg·d)]、高剂量组[0.4 mg/(kg·d)],每组5只，给药6 d后，PASI评估银屑病程度，HE染色检测皮肤损伤情况，实时定量PCR、 ELISA检测炎性相关mRNA表达及炎症因子浓度。结果cGAS-STING通路在银屑病患者病变皮肤中上调，hallmark基因集功能富集分析提示上调的基因富集在炎性相关通路；CucB抑制骨髓源性巨噬细胞(BMDM)和THP-1细胞经dsDNA诱导的干扰素调节因子3(IRF3)、 STING蛋白的磷酸化，抑制THP-1细胞经dsDNA诱导的干扰素β1基因(IFNB1)、肿瘤坏死因子α基因(TNF)、干扰素诱导蛋白含四肽重复序列1基因(IFIT1)、 C-X-C基序趋化因子配体10基因(CXCL10)、干扰素刺激基因15(ISG15) mRNA的表达以及上清中干扰素β(IFN-β)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的水平；CucB组小鼠的银屑病皮肤损伤及炎性浸润得到不同程度改善，ELISA结果提示CucB组炎症因子IL-6、 TNF-α、 IL-1β水平降低，实时定量PCR表明CucB组IL23A、 IL1B、 IL6、 TNF和IFNB1的mRNA水平降低。结论 CucB抑制dsDNA诱导的细胞cGAS-STING信号的活化；CucB显著改善银屑病小鼠皮肤损伤和炎症，潜在的分子机制可能与CucB下调cGAS-STING通路有关。

关键词

葫芦素B(CucB) / 银屑病 / 咪喹莫特(IMQ) / cGAS-STING / 炎症