ROCK-siRNA转染对AngⅡ诱导的内皮细胞衰老及内皮细胞微粒的影响

摘要

目的 探讨转染ROCK-siRNA对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的内皮细胞衰老及内皮细胞微粒（EMP）的影响。方法使用AngⅡ（1.0μmol/L）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）制备细胞衰老模型，并用ROCK干扰RNA（ROCK-siRNA）转染细胞，分为对照组、模型组、转染阴性对照组（AngⅡ联合NC-siRNA）、 ROCK-siRNA转染组（AngⅡ联合ROCK-siRNA）。采用SA-β-Gal法鉴定细胞衰老程度，流式细胞术检测培养液上清中EMP的数量及细胞内活性氧（ROS）水平，Western blot法检测各组细胞中沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）、 p53蛋白的表达。结果 ROCK-siRNA转染内皮细胞后，可明显减少AngⅡ诱导的衰老的内皮细胞数量，抑制衰老细胞释放CD31⁺ EMP及ROS生成，同时可上调SIRT1蛋白表达、下调p53蛋白表达水平。结论 沉默ROCK可抑制EMP释放，减少ROS生成，调控SIRT1、 p53表达，延缓AngⅡ诱导的内皮细胞衰老。

关键词

内皮细胞微粒(EMP) / 衰老 / ROCK / 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)