吴茱萸碱抑制活化T细胞增殖作用的研究

摘要

目的 探究吴茱萸碱（EVO）对活化T细胞增殖的抑制特性。方法 采用密度梯度离心法从健康供体中提取外周血单个核细胞（PBMC）,采用免疫磁珠法纯化T细胞，抗人CD3/CD28抗体活化T细胞。以不同浓度的EVO（0.37、1.11、3.33、 10）μmol/L作用于T细胞。流式细胞术测定T细胞增殖率、凋亡率、存活率、 CD25表达水平以及细胞周期分布。ELISA分析细胞因子白细胞介素2（IL-2）、 IL-17A、 IL-4和IL-10的表达水平。结果 （1.11、 3.33、 10）μmol/LEVO能有效抑制活化T细胞增殖，其半数抑制浓度(IC₅₀)为（1.5±0.3）μmol/L。EVO不诱导活化T细胞凋亡，且不影响静息T细胞的存活率。EVO不影响活化T细胞CD25的表达及IL-2的分泌。EVO阻滞T细胞周期于G2/M期，使G2/M期细胞增加，且具有浓度-效应关系。EVO不影响活化T细胞分泌IL-4、 IL-10,但显著抑制IL-17A的分泌。结论 EVO对T细胞的活化过程无显著影响，但可通过阻滞细胞周期于G2/M期，从而抑制T细胞的增殖，并显著抑制促炎因子IL-17A的分泌。提示EVO有望作为先导物，促进低毒高效性免疫抑制剂的研发，并有助于阐释传统中药吴茱萸在抗炎及免疫调节中的作用机制。

关键词

吴茱萸碱(EVO) / 免疫抑制剂 / 细胞周期 / 细胞因子 / 流式细胞术