龙胆苦苷调节SDF-1/CXCR4信号通路对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

摘要

目的 探究龙胆苦苷对人骨髓间充质干细胞(BMSC)成骨分化的影响，分析其机制是否与基质细胞衍生因子1(SDF-1)/C-X-C型趋化因子受体4(CXCR4)通路有关。方法 将BMSC分为正常培养的对照组、成骨诱导的模型组以及低剂量龙胆苦苷(L-龙胆苦苷，10μmol/L)组、中剂量龙胆苦苷(M-龙胆苦苷，20μmol/L)组、高剂量龙胆苦苷(H-龙胆苦苷，40μmol/L)组、 H-龙胆苦苷联合SDF-1/CXCR4通路抑制剂(AMD3100)(H-龙胆苦苷联合AMD3100, 40μmol/L龙胆苦苷联合10μg/mL AMD3100)组。CCK-8试剂盒、流式细胞术、 ALP染色、茜素红染色以及Western blot法分别检测细胞活性、细胞凋亡、 ALP活性、矿化结节以及SDF-1/CXCR4通路相关蛋白水平。结果 对照组和模型组均未见矿化结节，但模型组颜色加深；模型组较对照组吸光度(A)值、 ALP活性、 Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)、 SDF-1、 CXCR4蛋白表达增加，凋亡率降低；与模型组相比，L-龙胆苦苷组、 M-龙胆苦苷组、 H-龙胆苦苷组A值、 ALP活性、矿化结节、 RUNX2、 OPN、 SDF-1、 CXCR4蛋白表达依次增加，凋亡率依次降低；H-龙胆苦苷联合AMD3100组较H-龙胆苦苷组A值、 ALP活性、矿化结节、 RUNX2、 OPN、 SDF-1、 CXCR4蛋白表达降低，凋亡率增加。结论 龙胆苦苷对BMSC成骨分化的促进作用可能是通过激活SDF-1/CXCR4信号通路实现。

关键词

人骨髓间充质干细胞 / 龙胆苦苷 / SDF-1/CXCR4通路 / 成骨分化