吴茱萸碱通过调节CCL2/CCR2通路影响过敏性鼻炎大鼠免疫功能的研究

摘要

目的 探究吴茱萸碱(Evo)对过敏性鼻炎(AR)大鼠免疫功能的影响以及对C-C基序趋化因子配体2(CCL2)/C-C基序趋化因子受体2(CCR2)通路的调节机制。方法 网络药理学筛选Evo-AR-免疫功能的相关靶点，构建交集靶点的蛋白质互作网络图。采用卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝建立AR大鼠模型，并将大鼠分为正常对照(NC)组、模型(Model)组、氯雷他定(LOR)组、Evo低(Evo-L)剂量组、Evo高(Evo-H)剂量组、Evo-H联合CCL2组。末次给药结束后，对各组大鼠症状进行评分；ELISA检测组胺、免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素4(IL-4)、IL-13及γ干扰素(IFN-γ)的水平；迪夫快速(Diff-Quick)染色液检测鼻腔灌洗液(NALF)中的细胞数量；苏木素-伊红(HE)染色观察鼻黏膜组织的病理变化；实时定量PCR检测组织中CCL2和CCR2 mRNA水平；Western blot法检测鼻黏膜组织中CCL2、CCR2、CXC基序趋化因子配体8(CXCL8)蛋白表达。结果Evo-AR-免疫功能的交集靶点共有8个，蛋白质互作网络图显示CXCL8为核心靶点。与NC组相比，Model组大鼠的鼻部症状评分、组胺、IgE、IL-4、IL-13的水平、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和总细胞数、CCL2、CCR2 mRNA和蛋白表达、CXCL8蛋白表达均升高，IFN-γ水平降低；与Model组相比，LOR组和Evo处理组大鼠的鼻部症状评分、组胺、IgE、IL-4、IL-13的水平、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和总细胞数、CCL2、CCR2 mRNA和蛋白表达、CXCL8蛋白表达均降低，IFN-γ水平升高；进一步利用CCL2重组蛋白进行回补实验发现，Evo对AR大鼠免疫功能的改善作用被CCL2逆转。结论 Evo可以改善AR大鼠的免疫功能，其作用机制可能与CCL2/CCR2通路被抑制有关。

关键词

吴茱萸碱(Evo) / 过敏性鼻炎(AR) / C-C基序趋化因子配体2(CCL2) / C-C基序趋化因子受体2(CCR2) / 免疫功能