基于网络药理学探讨新型助眠汤通过调控小胶质细胞活化治疗失眠的机制研究

摘要

目的 在前期临床研究证实新型助眠汤对老年失眠具有显著疗效的基础上，本研究采用网络药理学联合体外实验方法，探讨其通过调控小胶质细胞活化改善失眠的潜在机制。方法 通过TCMSP和HERB数据库筛选助眠汤的活性成分及潜在靶点，并与失眠及小胶质细胞活化相关靶点交集，构建蛋白质互作(PPI)网络。利用DAVID平台进行基因本体论(GO)功能和KEGG通路富集分析，预测其核心作用通路。实验部分采用脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞活化模型，通过ELISA、实时定量PCR及一氧化氮(NO)检测评估助眠汤含药血清对炎症因子表达及小胶质细胞活化标志物的调控作用。结果 共筛得助眠汤活性成分87个、预测靶点831个，其中62个与失眠及小胶质细胞活化密切相关。PPI和通路分析表明，其靶点主要富集于高级糖基化终产物-受体(AGE/RAGE)、Toll样受体(TLR)、Janus激酶/信号转导及转录激活因子(JAK/STAT)和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)等经典神经炎症相关通路。体外实验结果显示，助眠汤含药血清显著抑制LPS诱导的白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和NO的表达，并降低了诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶2(COX-2)的mRNA水平，提示其通过抑制小胶质细胞活化和炎症反应改善失眠。IL-1β、IL-6、TNF-α及NO表达，同时下调iNOS和COX-2的mRNA及蛋白水平，提示其可有效抑制小胶质细胞活化及炎症反应。结论 新型助眠汤可能通过调控AKT等信号通路，抑制小胶质细胞促炎极化，减轻中枢神经炎症，进而发挥助眠作用。本研究揭示了该复方治疗失眠的潜在免疫机制，体现了中药多成分、多靶点调节神经炎症的新思路。后续研究可进一步解析关键活性成分及其作用靶点，并结合多组学技术完善机制图谱。

关键词

助眠汤 / 失眠 / 小胶质细胞 / 神经炎症 / 网络药理学