基于P2X7R/NLRP3通路探究壮药双路通脑方对缺血性中风模型大鼠神经炎症的影响

摘要

目的 基于嘌呤能2X7受体(P2X7R)/核苷酸结合寡聚化结构域受体蛋白3(NLRP3)通路探究壮药双路通脑方对缺血性中风(IS)大鼠神经炎症的影响。方法 大鼠分为IS组、对照组、双路通脑方组、 P2X7R抑制剂酸性亮蓝G(BBG)组、双路通脑方联合P2X7R激活剂三磷酸腺苷(ATP)组，每组18只。除对照组外，其他组大鼠均通过线栓法构建IS模型。建模成功后给药，给药1次/d,持续2周。检测大鼠神经功能评分及脑梗死体积占比；检测缺血半暗带脑组织病理；免疫荧光染色检测缺血半暗带脑组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和离子化钙结合适配分子1(Iba1)共表达阳性小胶质细胞数占比、精氨酸酶1(Arg1)和Iba1共表达阳性小胶质细胞数占比；ELISA检测缺血半暗带脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-10水平；Western blot法检测缺血半暗带脑组织中P2X7R、 NLRP3、 IL-1β蛋白表达。结果与对照组比较，IS组缺血半暗带脑组织神经元排列紊乱，核皱缩，且有大量炎性细胞浸润，神经功能评分、脑梗死体积占比、缺血半暗带脑组织中iNOS和Iba1共表达阳性小胶质细胞数占比、 TNF-α、 IL-6水平以及P2X7R、 NLRP3、 IL-1β蛋白表达升高，缺血半暗带脑组织中Arg1和Iba1共表达阳性小胶质细胞数占比、 TGF-β、 IL-10水平降低；与IS组比较，双路通脑方组、 BBG组缺血半暗带脑组织损伤有所缓解，神经功能评分、脑梗死体积占比、缺血半暗带脑组织中iNOS和Iba1共表达阳性小胶质细胞数占比、 TNF-α、 IL-6水平及P2X7R、 NLRP3、 IL-1β蛋白表达降低，缺血半暗带脑组织中Arg1和Iba1共表达阳性小胶质细胞数占比、 TGF-β、 IL-10水平升高；ATP逆转了壮药双路通脑方对IS大鼠小胶质细胞极化及神经炎症的影响。结论 壮药双路通脑方可能通过抑制P2X7R/NLRP3通路促进小胶质细胞由M1型向M2型转化，进而改善IS大鼠神经炎症。

关键词

神经炎症 / 壮药双路通脑方 / 缺血性中风(IS) / 小胶质细胞