不同培养时间对人单核细胞来源树突状细胞表型及其外泌体免疫膜蛋白的影响

摘要

目的 探讨培养时间对人单核细胞来源树突状细胞(DC)及其外泌体(DEX)免疫膜蛋白的影响。方法 采用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导人单核细胞分化成DC,并经肿瘤坏死因子α(TNF-α)促使其成熟；超速离心法分离DEX,透射电子显微镜及Amnis量化成像流式细胞术鉴定DEX并检测DC及DEX的免疫膜蛋白表达情况。结果 体外培养至第10天，DC表面即高表达CD11c、 CD80、 CD86、主要组织相容性复合体Ⅰ(MHC-Ⅰ)及MHC-Ⅱ分子，至第18天达峰值，表达率分别为CD11c(78.66±20.33)%、 CD80 (76.41±10.02)%、 CD86 (96.43±0.43)%、 MHC-Ⅰ(84.71±2.96)%、 MHC-Ⅱ(80.01±7.03)%,第24天后表达总体呈下降趋势(除CD80和MHC-Ⅱ外，差异均具有统计学意义);培养至第30天，仍有80%的DC表达CD80、 CD86、 MHC-Ⅱ分子。DEX表面免疫膜蛋白表达亦于第18天最高，随后随培养时间延长总体下降(除CD80外，差异均具有统计学意义)。相关性分析显示，DC与DEX表面的免疫膜蛋白表达水平呈显著正相关(CD11c:r=0.98;CD80:r=0.65;CD86:r=0.82;MHC-Ⅰ:r=0.86;MHC-Ⅱ:r=0.93)。结论 人单核细胞来源的DC在体外培养中可高效表达免疫膜蛋白，并在一定时间内保持稳定；其分泌的DEX表面同样高表达免疫膜蛋白，且二者表达变化趋势基本一致。

关键词

树突状细胞(DC) / 外泌体 / 免疫膜蛋白