嗅觉介导素4通过SIRT1/PGC-1α信号通路参与重度烧伤后炎症反应的分子机制研究

摘要

目的 探讨嗅觉介导素4(OLFM4)通过去乙酰化酶Sirtuin1/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(SIRT1/PGC-1α)信号通路参与重度烧伤后炎症反应的分子机制。方法 人皮肤成纤维细胞(HSF)分为：对照组、热损伤组、热损伤联合OLFM4组、热损伤联合sh-SIRT1组、热损伤联合sh-OLFM4组、热损伤和OLFM4联合sh-SIRT1组。将细胞悬液在52℃水中孵育30 s诱导热损伤。分别通过CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖能力，以及划痕实验检测细胞的迁移能力。将小鼠随机分为模型组、sh-SIRT1组、OLFM4组、OLFM4联合sh-SIRT1组，每组6只。各组小鼠建立30%总体表面积全层皮肤烧伤模型。分别向sh-SIRT1组、OLFM4组、OLFM4联合sh-SIRT1组小鼠皮内注射sh-SIRT1、OLFM4和OLFM4联合sh-SIRT1至烧伤边缘。在注射后4、 8、 16 d,观察并记录伤口愈合情况，并收集愈合组织进行分析。结果 与对照组相比，热损伤组HSF的细胞活力、 EdU阳性细胞数、细胞迁移、 SIRT1、 PGC-1α蛋白表达均显著降低。与热损伤组相比，热损伤联合OLFM4组HSF的细胞活力、 EdU阳性细胞数、细胞迁移、 SIRT1、 PGC-1α蛋白表达均显著增加，热损伤联合sh-OLFM4组HSF的细胞活力、 EdU阳性细胞数、细胞迁移、 SIRT1、 PGC-1α蛋白表达均进一步降低。与热损伤联合OLFM4组相比，热损伤和OLFM4联合sh-SIRT1组HSF的EdU阳性细胞数和细胞迁移率均显著降低。与模型组相比，OLFM4组创面组织中OLFM4、 SIRT1、 PGC-1α蛋白表达显著增加，创面愈合速度显著加快。与OLFM4组相比，OLFM4联合sh-SIRT1组创面组织中SIRT1、 PGC-1α蛋白表达显著降低，创面愈合速度显著减慢。与模型组相比，OLFM4组创面组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的mRNA表达水平显著降低，sh-SIRT1组创面组织中TNF-α、 IL-1β和IL-6的mRNA表达水平显著增加。与OLFM4组相比，OLFM4联合sh-SIRT1组创面组织中TNF-α、 IL-1β和IL-6的mRNA表达水平显著增加。结论 OLFM4上调可以促进HSF的增殖和迁移，局部上调OLFM4可以加快小鼠皮肤伤口的愈合速度，并减轻烧伤伤口在炎症阶段愈合组织的炎症反应，其作用机制可能与激活SIRT1/PGC-1α信号通路有关。

关键词

人皮肤成纤维细胞(HSF) / 嗅觉介导素4(OLFM4) / 重度烧伤 / 伤口愈合 / 小鼠