江苏地区献血人群HNA-1～-5基因型和基因频率的研究

摘要

目的 本研究探讨江苏地区献血人群人类中性粒细胞抗原(HNA)-1～-5等位基因的基因型和基因频率的分布特征。方法 收集健康献血者的抗凝血液样本300例，提取基因组DNA。采用优化的序列特异性引物聚合酶链式反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对所有样本进行扩增统计结果，随机抽取部分结果进行测序验证；对筛查结果进行Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验。采用聚合酶链式反应-直接测序法(PCR-SBT)和聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)对筛选出的HNA-1 null进行确认。结果 HNA-1a、 HNA-1b和HNA-1c的等位基因频率分别为58.6%、 41.4%和0%,筛选出的2例HNA-1 null确认为免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲb(FCGR3B)基因完全缺失。编码HNA-2的CD177基因频率为100%,未发现c.787 A>T纯合突变(TT)导致的HNA-2 null。HNA-3a、 HNA-3b、 HNA-4a、 HNA-4b、 HNA-5a、 HNA-5b的等位基因频率分别为63.0%、 37.0%、 100%、 0%、 88.8%和11.2%。江苏与上海、浙江的HNA基因频率无统计学差异，与广州地区仅HNA-1a/1a(P=0.008)、 HNA-3a/3a(P=0.033)、 HNA-3b/3b(P=0.022)有统计学差异。结论 本研究获得的江苏地区HNA基因型和基因频率，为HNA引起的相关同种免疫的研究提供了基础数据。优化了适用于大规模筛查HNA的实验方法，构建了完整的HNA-1 null确证试验，为HNA-1 null的后续研究提供了实验基础。

关键词

人类中性粒细胞抗原(HNA) / 序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP) / 基因型 / 基因频率 / HNA-1缺失型

基金资助

江苏省输血协会爱康生物科研基金项目(JSAK2023007)