基于转录组学-网络药理学探讨加味当归补血汤对CIPN模型小鼠神经炎症的干预机制

摘要

目的 探讨加味当归补血汤干预化疗致周围神经毒性(CIPN)模型小鼠神经炎症的作用靶点。方法 SPF级C57BL/6J小鼠60只，除空白组外，其余48只在腋下异位移植胃癌细胞，并随机分为4组：胃癌组、 CIPN模型组、加味当归补血汤组和度洛西汀组，每组12只，除胃癌组外，其余组腹腔注射奥沙利铂构建胃癌铂类CIPN模型，药物干预组分别给予相应剂量药液灌胃，其余组灌胃等量生理盐水，每日1次，28 d后，进行行为学实验(机械痛、冷刺实验),取小鼠背根神经节(DRG)经转录组学、透射电镜(TEM)、Western blot法及实时定量PCR对相应指标进行检测。结果 行为学实验结果显示：给药28 d后，与空白组相比，CIPN模型组机械痛阈值呈下降趋势，冷刺缩足次数呈上升趋势；与CIPN模型组比，胃癌组、加味当归补血汤组、度洛西汀组机械痛阈值呈上升趋势，冷刺缩足次数呈下降趋势。转录组学结果显示：加味当归补血汤可通过抑制核因子κB(NF-κB)、共济失调毛细血管扩张症突变基因(ATM)、 CC趋化因子配体21(CCL21)发挥作用。网络药理学结果提示，加味当归补血汤可能通过抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6干预CIPN的发生。TEM结果显示：除空白组外，其余四组DRG内有髓神经纤维均出现异常。与空白组比，CIPN模型组有髓神经纤维出现脱髓鞘和溶解现象且髓鞘板层排列疏松，线粒体嵴断裂溶解，出现空泡化；与CIPN模型组比，加味当归补血汤组及度洛西汀组上述损伤均有所减轻。Western blot法、实时定量PCR检测结果显示：与空白组比，CIPN模型组DRG ATM、 NF-κB、 CCL21、 TNF-α、 IL-1β、 IL-6蛋白和基因表达显著升高；与CIPN模型组比，胃癌组、加味当归补血汤组和度洛西汀组中ATM、 NF-κB、 CCL21、 TNF-α、 IL-1β、 IL-6蛋白和基因表达显著下降。结论 加味当归补血汤可改善胃癌奥沙利铂CIPN模型小鼠DRG病理损伤及疼痛症状，其机制可能与其抑制DRG NF-κB信号通路，下调ATM、 NF-κB、 CCL21、 TNF-α、 IL-1β及IL-6的表达有关。

关键词

化疗致周围神经毒性(CIPN) / 加味当归补血汤 / 背根神经节(DRG) / NF-κB信号通路