RhoA/ROCK2信号通路调控单增李斯特菌感染巨噬细胞炎性反应和迁移能力的机制研究

摘要

目的 探讨Ras同源基因家族成员A（RhoA）对单增李斯特菌（Lm）感染RAW264.7小鼠巨噬细胞炎性反应、迁移的调控作用。方法 采用小干扰RNA（si-RhoA）抑制RAW264.7细胞RhoA表达，Lm以感染复数（MOI）=10感染转染了si-RhoA 48 h的RAW264.7细胞。吞噬实验检测RAW264.7细胞吞噬细菌的能力；Transwell^TM迁移实验检测RAW264.7细胞迁移能力；实时荧光定量PCR检测RAW264.7细胞白细胞介素1β（IL-1β）、 IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、 IL-10的mRNA表达；ELISA检测细胞上清IL-1β、 IL-6、 TNF-α、 IL-10的含量；Western blot法检测Rho相关蛋白激酶1/2（ROCK1/2）蛋白的表达。结果 敲低RhoA可使Lm感染的RAW264.7细胞的迁移能力降低，抑制IL-1β和IL-6 mRNA和蛋白的表达，对TNF-α和IL-10的表达无明显影响；同时RAW264.7细胞ROCK2蛋白表达显著减少，ROCK1蛋白表达无差异。结论 干扰RhoA阻断ROCK2信号通路抑制Lm感染RAW264.7细胞炎性反应和迁移能力，靶向RhoA/ROCK2信号通路可能成为抗Lm感染的新策略。

关键词

炎性反应 / 单增李斯特菌(Lm) / RAW264.7细胞 / Ras同源基因家族成员A(RhoA)

基金资助

科技部基础平台资助项目(2019-194-30)