敲低IL-1R8增强体外扩增NK细胞对肝细胞癌的抑制作用

摘要

目的 白细胞介素1受体8(IL-1R8)在活化的自然杀伤(NK)细胞中显著高表达，可负调控NK细胞的抗肿瘤免疫应答。本研究通过敲低体外扩增NK细胞的IL-1R8基因，探讨其对肝细胞癌(HCC)体内外杀伤活性的调控作用。方法 采用慢病毒shRNA技术敲低人体外扩增NK细胞的IL-1R8表达，通过实时定量PCR和Western blot法验证基因敲低效率；台盼蓝染色检测NK细胞增殖能力，流式细胞术分析IL-1R8敲低前后NK细胞主要表型受体的表达差异；乳酸脱氢酶释放实验检测NK细胞对HCC的体外杀伤毒性；ELISA检测NK细胞杀伤过程中细胞因子和趋化因子的分泌水平；构建Huh-7肝癌皮下移植瘤小鼠模型，评价IL-1R8敲低NK细胞的体内抑瘤效应，并采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织中NK细胞的浸润。结果 敲低IL-1R8对NK细胞的增殖能力和主要细胞表型无明显影响；IL-1R8沉默可显著增强NK细胞对HCC的体外杀伤活性，并明显促进肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、C-C基序趋化因子配体3(CCL3)和C-X-C基序趋化因子配体8(CXCL8)的分泌。体内实验显示，IL-1R8敲低NK细胞可有效抑制HCC移植瘤生长，并显著提升肿瘤组织中NK细胞的浸润水平。结论 靶向敲低IL-1R8可显著增强NK细胞的体内外抗肝癌活性，为优化NK细胞肿瘤免疫治疗策略提供新的实验依据与研究方向。

关键词

白细胞介素1受体8(IL-1R8) / NK细胞 / 肝细胞癌(HCC) / 免疫疗法

基金资助

江西省自然科学基金面上项目(20252BAC240429); 国家自然科学基金地区项目(81960041)