加味异功散对食物过敏Th17/Treg免疫平衡的影响及作用机制

摘要

目的 探讨加味异功散(JWYGS)对食物过敏(FA)17型辅助T(Th17)细胞/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响及作用机制。方法 通过网络药理学筛选JWYGS的活性成分、作用靶点及FA相关靶点，对药物靶点与FA靶点取交集，构建蛋白相互作用(PPI)网络图，结合基因本体论(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析预测关键通路，利用分子对接验证主要活性成分与核心靶点之间的结合效能。将小鼠随机分为对照组、模型组、 JWYGS低、中、高剂量组、地塞米松组，采用卵清蛋白(OVA)诱导的FA模型，OVA激发期间连续每天给药后，进行小鼠过敏及腹泻症状评分，HE染色评估小肠组织病理改变，ELISA检测血清卵清蛋白特异性免疫球蛋白E(OVA-sIgE)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-17、 IL-2、 IL-10水平，免疫组织化学染色法检测小肠组织IL-6、 IL-17、 IL-10表达水平，流式细胞术检测脾脏Th17细胞、 Treg数量并计算Th17/Treg比值，实时定量PCR法检测小肠组织IL-6、维甲酸相关孤儿受体γt (RORγt)、叉头盒蛋白P3(FOXP3)的mRNA表达。结果 网络药理学筛选得到235个药物作用靶点及136个共同靶点，GO及KEGG富集分析涉及细胞因子应答、 Th17细胞分化等。分子对接结果显示主要活性成分与核心靶点结合稳定。与对照组相比，模型组的过敏及腹泻评分显著升高，小肠组织出现明显炎症浸润及黏膜损伤，血清OVA-sIgE、 IL-17、 IL-6、 IL-2水平、脾脏Th17细胞数量及Th17/Treg比值、小肠组织IL-6、 IL-17表达及IL-6、 RORγt的mRNA表达明显升高，血清IL-10水平、小肠组织IL-10及FOXP3 mRNA表达明显降低；JWYGS治疗后，小鼠过敏及腹泻症状评分显著降低，小肠炎症浸润及黏膜损伤减轻，血清OVA-sIgE、 IL-17、 IL-6、 IL-2水平、脾脏Th17细胞数量及Th17/Treg比值、小肠组织IL-6、 IL-17表达及IL-6、 RORγt的mRNA表达降低，血清IL-10水平、小肠组织IL-10表达及FOXP3 mRNA表达升高，且JWYGS优效组与地塞米松组疗效相当。结论 JWYGS可改善FA小鼠症状及Th17/Treg免疫失衡，其机制可能与抑制IL-6转录并调控RORγt/FOXP3表达有关。

关键词

食物过敏(FA) / 加味异功散(JWYGS) / Th17/Treg / 网络药理学 / 分子对接

基金资助

广东省基础与应用研究基金自然科学基金项目(2023A1515110771); 广东省名中医传承工作室建设项目(粤中医办函[2023]108号)