优化的透射电镜技术精准揭示疾病模式生物果蝇的超微结构

摘要

目的 针对果蝇胸部肌肉组织透射电镜样品前处理存在的目标定位难、超微结构呈现模糊等关键问题，本研究优化制样方法，旨在为基于模式生物果蝇的疾病机制解析提供技术支撑。方法 系统比较不同解剖策略(去头法、目标组织解剖分离法)与染色方案(组织块染色/不染色、非块染法)对切片定位准确性、定向一致性及电镜超微结构对比度的影响，筛选适用方法。结果 树脂包埋块观察显示，“解剖分离目标组织”法的包埋块中肌肉组织呈平行排列条状，聚合稳定，为精准定位奠定基础；光镜观察表明，该方法半薄切片目标组织占比显著高于去头法，有效降低非目标干扰，大幅度提升定位定向效率(对疾病精细结构分析至关重要);透射电镜显示，组织块染色法(简称“块染”)使线粒体膜、肌原纤维等超微结构对比度显著增强，未块染样品结构模糊；去头样品因脱水渗透不彻底出现空洞，影响细胞器观察(对线粒体疾病分析提出更高要求)。结论 “解剖分离目标组织”联合“组织块染色”可精准提升疾病模式生物果蝇胸部肌肉定位定向效率及电镜成像质量，为揭示人类多种疾病的发病机制和开发新的治疗方法提供方法支持。

关键词

果蝇 / 胸部肌肉 / 解剖分离 / 组织块染色 / 透射电镜样品前处理

基金资助

国家自然科学基金项目(62265005); 广西自然科学基金项目(2022GXNSFAA035564); 广西高校中青年教师科研基础能力提升项目(2022KY0490,2022KY0495); 桂林市科学研究与技术开发计划项目(20220139-6-1)