OPG过表达的ADSC对大鼠牙槽后槽骨缺损的修复作用

摘要

目的：探究骨保护素（Osteoprotegerin,OPG）过表达的脂肪间充质干细胞（Adipose-derivedstemcell,ADSC对大鼠牙槽后槽骨缺损修复的影响。方法：选择SD雄性大鼠38只，其中6只用于获得ADSC及ADSCOPG过表达转染，鉴定转染情况并观察不同ADSC的形态、成骨分化、成脂分化及增殖能力；其中8只作为对照组，另外24只建立牙槽后槽骨缺损大鼠模型，随机分为模型组、正常ADSC组和OPG过表达的ADSC组。6周后，Micro-CT扫描观察骨缺损愈合情况；苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色观察骨缺损组织病理改变；免疫组化分析组织中碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）、骨钙素（Osteocalcin,OCN）的表达；Westernblot分析组织中OPG/核因子-κB受体活化因子配体（Receptoractivatorofnuclearfactor-κBligand,RANKL）/核因子-κB受体活化因子（Receptoractivatorof nuclearfactor-κB,RANK）通路蛋白表达。结果：携带空载体与OPG过表达慢病毒的转染效率分别为75.23%和79.08%；两种ADSC均为长梭形；OPG过表达ADSC中的OPG蛋白表达水平、增殖能力、成骨能力明显高于正常ADSC，成脂能力明显低于正常ADSC(P<0.05)；与对照组相比，模型组的牙槽后槽骨缺损体积、RANKL、RANK蛋白表达水平明显升高，Lane-Sandhu组织学评分、ALP、OCN阳性表达率、OPG蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组相比，正常ADSC组获得与上述相反的结果；OPG过表达的ADSC组上述指标的变化幅度较正常ADSC组更显著。结论：OPG过表达的ADSC能够促进大鼠牙槽后槽骨缺损的修复。

关键词

脂肪间充质干细胞 / 骨保护素 / 牙槽后槽骨缺损 / 大鼠 / 成脂分化能力 / 成骨分化能力