miR-130a-5p靶向Runx2对牙槽骨成骨细胞增殖和分化的影响及其调控机制研究

张义林; 侯旭; 汪莉; 朗么磋; 李相宜

doi:10.15909/j.cnki.cn61-1347/r.006335

中国美容医学 ›› 2024, Vol. 33 ›› Issue (6) : 51 -55. DOI: 10.15909/j.cnki.cn61-1347/r.006335

miR-130a-5p靶向Runx2对牙槽骨成骨细胞增殖和分化的影响及其调控机制研究

张义林, 侯旭, 汪莉, 朗么磋, 李相宜

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摘要

目的：探究miR-130a-5p靶向Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2，Runx2)对牙槽骨成骨细胞(Alveolar osteoblast，AOB)增殖、凋亡、成骨分化的影响及其机制。方法：将AOB分为NC组、miR-NC组、miR-130a-5p组、miR-130a-5p+Runx2组和miR-130a-5p+SHH组。双荧光素酶报告验证miR-130a-5p对Runx2、Sonic hedgehog(SHH)的调控关系；CCK-8及EdU染色检测细胞增殖能力；AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡能力；ALP染色、茜素红染色检测细胞成骨分化能力；RT-qPCR检测miR-130a-5p、Runx2、SHH、神经胶质瘤关联癌基因同源物1(Gli1)mRNA水平；Western Blot检测增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)、Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2，Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 related X protein，Bax)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)、骨钙素(Osteocalcin，OCN)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2，BMP2)、Runx2、SHH、Gil1水平。结果：miR-130a-5p靶向调控Runx2、SHH。过表达miR-130a-5p后，细胞24 h、48 h、72 h OD值及EdU阳性率降低，细胞凋亡率升高，成骨分化能力降低，miR-130a-5p、Bax蛋白水平升高，Runx2、PCNA、Ki67、Bcl-2、ALP、OCN、BMP2蛋白及SHH、Gil1 mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。过表达miR-130a-5p和Runx2或过表达miR-130a-5p和SHH可减弱过表达miR-130a-5p对细胞增殖、凋亡、成骨分化的影响。结论：miR-130a-5p靶向Runx2抑制AOB增殖和成骨分化，并促进AOB凋亡，其可能通过抑制SHH信号通路发挥作用。