不同感受态转化的慢病毒质粒的转染及感染效率的比较

才文道力玛; 伊敏娜; 赵比力格; 斯琴; 芒来; 格日乐其木格

doi:10.16853/j.cnki.1009-3575.2025.02.001

内蒙古农业大学学报（自然科学版） ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (02) : 1 -8. DOI: 10.16853/j.cnki.1009-3575.2025.02.001

不同感受态转化的慢病毒质粒的转染及感染效率的比较

才文道力玛, 伊敏娜, 赵比力格, 斯琴, 芒来, 格日乐其木格

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摘要

外源质粒转化宿主细胞已成为基因工程和DNA克隆技术的基础与核心，是现代分子生物学的重要技术之一。使用大肠杆菌感受态细胞进行转化试验完成外源基因的表达是实验室常用的手段。但由于大肠杆菌感受态细胞种类繁多，选择基因表达效果理想的感受态细胞是必要的。因此，为获得用于马胚胎成纤维细胞感染慢病毒包装体系的转化感受态，本研究分别用了3种不同的感受态细胞（DH5α、Stbl3和INV110）来转化FUW-tetO-EGFP质粒后，使用293T细胞包装病毒颗粒，之后用收集的病毒颗粒感染293T细胞和马胚胎成纤维细胞，通过观察荧光信号，比较三者的转染及感染效率。结果显示：对于转染效率的比较，使用DH5α感受态细胞转化之后的质粒转染293T细胞的效率显著高于INV110感受态细胞和Stbl3感受态细胞；而对于感染效率的比较，使用Stbl3感受态细胞转化之后的质粒包装的病毒感染293T细胞和马胚胎成纤维细胞的效率都显著高于DH5α感受态细胞和INV110感受态细胞。上述结论表明了Stbl3感受态细胞可用于马胚胎成纤维细胞感染慢病毒质粒转化，这一结果将为建立完整的慢病毒包装体系奠定基础，为后续马的基因功能研究工作提供基础试验数据。